Implication of rpe-derived exosomes in blood vessel formation under stress conditions

Resumen

El epitelio pigmentario de la retina (EPR) juega un papel importante en la fisiología y patología de la retina, debido a su localización y a su metabolismo. Está demostrado que el daño oxidativo es un mecanismo patogénico en muchas enfermedades retinianas, y que, además, las especies reactivas del oxígeno (ERO) son subproductos del metabolismo del etanol. La autofagía y la secreción de exomas juegan un papel importante en la variabilidad fisiológica y en los estados de enfermedades, incluyendo el desarrollo neovascular de la degeneración macular asociada a la edad (NV DMAE). Estudios previos han demostrado que estos mecanismos celulares comparten vías comunes de activación. Un leve daño oxidativo en ARPE-19, una línea celular de RHE humano, altera tanto la autofagia como la biogénesis exosómica. Además, el estrés oxidativo modifica la carga proteica y genética de las EVs, lo que posiblemente afecte el destino de las células circundantes. Para comprender la conexión entre estos dos mecanismos y su impacto sobre la angiogénesis, las células ARPE-19 sometidas a estrés se trataron con un SiARN dirigido a Atg7, una proteína clave para la formación de autofagosomas. Posteriormente, observamos la formación de cuerpos multivesiculares y la liberación de exosomas, que se encontró que disminuyeron en número. Los exosomas liberados de EPR contenían VEGFR2, fundamental para la formación de vasos, como parte de su carga. Este receptor para VEGF, se incrementó en las poblaciones de exosomas liberados de las células ARPE-19 bajo estrés oxidativo. Éstos exosomas potenciaron la formación de tubos de células endoteliales, sin embargo, se volvieron ineficaces después de silenciar VEGFR2 en células ARPE-19 y, no pudiendo influir en la angiogénesis. En vista de estos resultados, proponemos que el crecimiento anormal de los vasos se correlaciona con la expresión de VEGFR2.